仪器及试剂:仪器为药物粉碎机、分析天平、凯氏定氮仪(包括凯氏定氮蒸馏装置和消化炉)、凯氏烧瓶。试剂为浓硫酸(AR级);50%氢氧化钠溶液;硫酸钾;硫酸铜;0.1mol/L盐酸标准溶液;甲基红-溴甲酚绿混合指示剂。本文我们采用GB/T5009.5—2003国际标准法来测定蛋白质含量。
实验过程:将成熟后的枯黄的茎秆粉碎过筛后备用。去试样0.500~2.000g准确至0.0002g,放入凯氏烧杯中,加入10g无水硫酸钾0.5g硫酸铜和20ml浓硫酸。和2粒玻璃珠,将凯氏烧杯置于电炉上加热,开始小火,代样品焦化,泡沫消失后,再火力直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,约2h;去出凯氏烧瓶加入约200ml蒸馏水,连接定氮蒸馏装置,将馏出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含数滴甲基红的01.mol/L标液的三角烧瓶中,在凯氏烧瓶内加入少许沸石缓缓加入80ml50%氢氧化钠溶液,立即连接好定氮球,检查整个定氮装置是否漏气,用直接火源加热蒸馏,蒸馏至凯氏烧瓶内残渣三分之一时,打开定氮球与凯氏烧瓶的塞口,停止加热;1)用0.1000mol/LHCl标液进行滴定,移取样品至锥形瓶中用0.1000mol/LHCl标液进行滴定,直至标准溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。此时消耗盐酸的量记为V2;2)空白实验取与消化样品时同样的量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸,按上述方法进行消化、定容到100ml,的空白消化液,取同量空白消化液进行蒸馏,用指示剂滴定至红色消失为终点。此时消耗盐酸的量记为V1。
结果计算:总氮量(%)=C*(V2-V1)÷1000×14.1/w;注C-盐酸的摩尔溶液;V1-空白滴定消耗标准液的量(ml);V2-样品滴定消耗标准酸液的量(ml);w-样品的质量;14.1-氮的摩尔质量。蛋白质(%)=总氮量%*K;K-氨转换为蛋白质的系数取5.7。
结论:从我们的的实验结果发现,这批青稞秸秆蛋白质含量较低,平均为1.482,与作为饲料时蛋白质含量在2-8%之间还有一定的差距。因此直接将青稞秸秆作为饲料是不合理的,因为其蛋白质含量低、质地粗硬,适口性差且不易消化和吸收,但是秸秆中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所积累的一半能量,且分布广泛,竞争性用途少,开发利用潜力很大。
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